Talaan ng mga Nilalaman:
- Maghanda ng Stock Solution ng EDTA
- Paikutin ang Stock Solution ng TAE
- Maghanda ng Paggawa Solusyon ng TAE
- Ano ang Kailangan Mo para sa Buffer
- Pagbabalot Up
Video: How to Take Apart Xbox One Controller 2024
TAE buffer ay isang solusyon na binubuo ng Tris base, acetic acid at EDTA (Tris-acetate-EDTA). Ang kasaysayan ay ang pinaka-karaniwang buffer na ginagamit para sa agarose gel electrophoresis sa mga pag-aaral ng mga produktong DNA na nagreresulta mula sa paglaki ng PCR, mga protocol ng paglilinis ng DNA o mga eksperimento ng DNA cloning.
Ang buffer na ito ay may mababang ionic na lakas at mababang buffering capacity. Ito ay pinaka-angkop sa electrophoresis ng malaking (> 20 kb) piraso ng DNA at kailangang palitan ng madalas o recirculated para sa mas matagal na (> 4 h) gel run times. Sa pag-iisip na ito, maaaring gusto mong isaalang-alang ang ilang mga batch ng buffer.
Given na ang buffer ay madaling gawin at ang mga hakbang ay maaaring maisakatuparan nang mabilis, ang paggawa ng higit sa isang batch sa isang pagkakataon ay hindi dapat maging partikular na oras-ubos o mahirap na pull off. Gamit ang mga tagubilin sa ibaba, dapat itong tumagal ng 30 minuto upang gawin ang TAE buffer. Ganito:
Maghanda ng Stock Solution ng EDTA
Ang solusyon ng EDTA (ethylenediamine tetraacetic acid) ay inihanda nang maaga. Ang EDTA ay hindi magiging ganap na solusyon hanggang sa ang pH ay nababagay sa tungkol sa 8.0. Para sa 500-milliliter stock na solusyon ng 0.5 M EDTA, timbangin ang 93.05 gramo ng EDTA disodium salt (FW = 372.2). Dissolve sa 400-milliliters deionized water at ayusin ang pH na may sodium hydroxide (NaOH). Itaas ang solusyon sa isang pangwakas na dami ng 500 mililitro.
Paikutin ang Stock Solution ng TAE
Gumawa ng isang konsentrado (50x) stock solusyon ng TAE sa pamamagitan ng pagtimbang ng 242 gramo ng base Tris (FW = 121.14) at dissolving ito sa humigit-kumulang na 750 mililitro ng deionized na tubig. Maingat na idagdag ang 57.1 milliliters ng glacial acid at 100 milliliters ng 0.5 M EDTA (pH 8.0). Pagkatapos nito, ayusin ang solusyon sa huling dami ng 1 litro. Ang stock solusyon ay maaaring maitago sa temperatura ng kuwarto. Ang pH ng buffer na ito ay hindi nababagay at dapat ay tungkol sa 8.5.
Maghanda ng Paggawa Solusyon ng TAE
Ang nagtatrabaho na solusyon ng 1x TAE buffer ay ginawa sa pamamagitan lamang ng paglutas ng stock solusyon sa pamamagitan ng 50x sa deionized tubig. Ang huling konsentrasyon ng solute ay 40 mM. Tris-acetate at 1 mM EDTA. Ang buffer ay handa na para gamitin sa pagpapatakbo ng isang agarose gel.
Ano ang Kailangan Mo para sa Buffer
Dahil ang paggawa ng TAE buffer ay nangangailangan lamang ng isang mabilis at simpleng hanay ng mga tagubilin, ang bilang ng mga materyales na kinakailangan para dito ay hindi labis. Kakailanganin mo lang ng EDTA disodium salt, Tris base, at glacial acetic acid.
Ang paggawa ng buffer ay nangangailangan din ng isang pH meter at mga pamantayan ng pagkakalibrate, kung naaangkop. Kailangan mo rin ng 600 milliliter at 1500 milliliters beakers o flasks pati na rin ang mga nagtapos na mga cylinder. Sa wakas, kakailanganin mo ng deionized water, stir bars, at stir plates.
Pagbabalot Up
Saan mo pinaplano na gawin ang buffer - sa isang paaralan site, isang site ng trabaho, o ibang lokasyon, tulad ng iyong bahay? Suriin ang imbentaryo bago ka magsimula upang tiyakin na mayroon ka ng lahat ng mga materyales sa itaas para sa TAE buffer.
Kung mas gugustuhin mong huwag magbayad para sa mga materyales, inirerekomenda na ang pag-opt ng buffer sa labas ng iyong tahanan. Maaari mong madaling mag-order ng mga materyales na kailangan mo online o bisitahin ang isang specialty store para sa kanila.
Paano Gumawa ng baitang: Hakbang sa Hakbang sa Paano Magtayo ng baitang
Paano Gumawa ng baitang: Hakbang sa Hakbang sa Paano Magtayo ng baitang
Paano Gumawa ng TBE Buffer sa 3 Madali na Mga Hakbang
Gamitin ang mga simpleng tagubilin upang gumawa ng stock at nagtatrabaho na mga solusyon ng TBE (tris-borate-EDTA) buffer para sa gel electrophoresis separation ng DNA.
Alamin kung Paano Walang Tubig na Basement - Hakbang sa Hakbang
Maaaring humantong sa maraming problema ang basement waterproofing dahil sa hindi sapat o mahirap trabaho. Ang pagsipsip ay maaaring maging sanhi ng malawak na pinsala kung hindi ito maayos na natugunan.